Jurnal Internasional Mutasi novel RAG1 mengungkapkan peran in vivo yang penting untuk HMGB1 / 2 selama rekombinasi V (D) J

Download Jurnal Disini

Poin-Poin Penting

  • Mutasi novel RAG1 secara signifikan mengurangi pengikatan protein aksesori, HMGB1, untuk mengurangi rekombinasi V (D) J in vitro dan in vivo.

  • Studi knockdown komplementer dari HMGB1 memberikan bukti kuat pertama bahwa HMGB1 penting untuk rekombinasi V (D) J in vivo.

Abstrak

Abstrak

Gen Pengaktif Rekombinasi, RAG1 dan RAG2sangat penting untuk rekombinasi V (D) J dan kekebalan adaptif. Mutasi pada gen ini sering menyebabkan defisiensi imun, yang keparahannya mencerminkan pentingnya residu atau residu yang berubah selama rekombinasi. Di sini, kami mendeskripsikan mutasi novel RAG1 yang menyebabkan defisiensi imun dengan cara yang tidak terduga: Protein bermutasi sangat mengganggu pengikatan protein aksesori, HMGB1. Meskipun HMGB1 meningkatkan pemotongan RAG secara in vitro, perannya in vivo masih kontroversial. Kami menunjukkan di sini bahwa berkurangnya pengikatan HMGB1 oleh protein mutan secara dramatis mengurangi pemotongan RAG in vitro dan hampir sepenuhnya menghilangkan rekombinasi in vivo. Mutasi RAG1, R401W, menempatkan triptofan besar di seberang situs pengikatan untuk HMG Kotak A pada urutan sinyal rekombinasi 12 dan 23 spacer, mengganggu pengikatan HMGB1 yang stabil. Penggantian R401W dengan leusin dan kemudian lisin secara progresif mengembalikan ikatan HMGB1, berkorelasi dengan peningkatan pemotongan RAG dan rekombinasi in vivo. Kami menunjukkan lebih jauh bahwa knockdown HMGB1 secara signifikan mengurangi rekombinasi oleh tipe liar RAG1, sedangkan penambahannya mengembalikan rekombinasi dengan tipe liar, tetapi tidak mutan, protein RAG1. Bersama-sama, data ini memberikan bukti kuat bahwa HMGB1 memainkan peran penting selama rekombinasi V (D) J in vivo.

  • Diserahkan 31 Juli 2018.
  • Diterima 4 Desember 2018.

Download Jurnal Disini

Tags: