Jurnal Internasional Mutasi FBXW7 mengurangi pengikatan NOTCH1, yang menyebabkan akumulasi NOTCH1 yang terputus dan aktivasi gen target di CLL

Download Jurnal Disini

NOTCH1 dimutasi pada 10% pasien leukemia limfositik kronis (CLL) dan berhubungan dengan hasil yang buruk. Namun, aktivasi NOTCH1 diidentifikasi dalam sekitar setengah kasus CLL bahkan tanpa adanya mutasi NOTCH1. Oleh karena itu, tampaknya ada faktor tambahan yang bertanggung jawab atas penurunan degradasi NOTCH1. E3-ubiquitin ligase F-box dan domain berulang WD40 yang mengandung-7 (FBXW7), regulator negatif NOTCH1, dimutasi pada 2% hingga 6% dari pasien CLL. Konsekuensi fungsional dari mutasi pada CLL ini tidak diketahui. Kami menemukan mutasi heterozigot FBXW7 di 36 dari 905 (4%) pasien CLL yang tidak diobati. Mayoritasnya adalah mutasi missense (78%) yang sebagian besar memengaruhi domain pengikat media WD40; 10% mutasi terjadi pada ekson pertama α-isoform. Untuk mengidentifikasi protein target FBXW7 di CLL, kami memotong domain WD40 dalam garis sel CLL HG-3 melalui pengulangan palindromik pendek berulang secara berulang (CRISPR) / protein terkait-CRISPR-terkait (Cas9). Pemotongan homozigot FBXW7 menghasilkan peningkatan domain intraseluler NOTCH1 (NICD) dan tingkat protein c-MYC yang teraktivasi serta peningkatan aktivitas faktor 1-α yang diinduksi hipoksia. Dalam pemodelan silico meramalkan bahwa mutasi novel G423V dan W425C dalam FBXW7 -WD40 domain mengubah pengikatan substrat protein. Pengikatan diferensial ini dikonfirmasi melalui coimmunoprec presipitasi FBXW7 dan NOTCH1 yang diekspresikan secara berlebihan. Dalam sel-sel CLL primer yang menyimpan mutasi FBXW7level NICD teraktivasi meningkat dan tetap stabil pada penghambatan translasi. Mutasi FBXW7 bertepatan dengan peningkatan ekspresi gen target NOTCH1 dan menjelaskan proporsi pasien yang ditandai oleh pensinyalan NOTCH1 yang tidak teratur.

Download Jurnal Disini

Tags: