Jurnal Internasional LRRK2-dimediasi fosforilasi Rab10 dalam sel kekebalan dari pasien penyakit Parkinson – Atashrazm – – Gangguan Gerakan

Download Jurnal Disini

GAMBAR TAMBAHAN 1 Pengukuran kemurnian neutrofil setelah isolasi. Neutrofil yang terisolasi diwarnai dengan penanda permukaan neutrofil CD66b, dan proporsi sel positif CD66b ditentukan oleh flow cytometry. Plot sitometri aliran yang representatif ditunjukkan.

SUPPLEMENTARY Gbr. 2. Pengukuran kemurnian PBMC setelah isolasi. PBMC yang terisolasi diwarnai dengan penanda permukaan neutrofil CD66b, dan proporsi sel-sel CD66b-negatif ditentukan oleh flow cytometry. Plot sitometri aliran yang representatif ditunjukkan.

SUPPLEMENTARY Gbr. 3. Contoh immunoblot yang tidak dipangkas dari PBMC. Semua sampel menjadi sasaran SDS-PAGE pada saat yang sama dan ditransfer dan immunoblotted secara identik. Semua strip dicitrakan pada saat bersamaan. Strip tanpa ikatan representatif diperlihatkan untuk semua antibodi. * Band yang dikuantifikasi. C, mengontrol sampel; P, sampel penyakit Parkinson.

TAMBAHAN Gbr. 4. Contoh immunoblot yang tidak dipangkas dari neutrofil. Semua sampel menjadi sasaran SDS-PAGE pada saat yang sama dan ditransfer dan immunoblotted secara identik. Semua strip dicitrakan pada saat bersamaan. Strip tanpa ikatan representatif diperlihatkan untuk semua antibodi. * Band yang dikuantifikasi. C, mengontrol sampel; P, sampel penyakit Parkinson.

TAMBAHAN Gbr. 5. Contoh immunoblot yang tidak dipangkas dari PBMC yang diobati dengan inhibitor. Untuk menilai efek penghambatan LRRK2, semua sampel awal adalah imunoblot lagi bersama sampel yang terkait dengan inhibitor yang diobati. Semua sampel menjadi sasaran SDS-PAGE pada saat yang sama dan ditransfer dan immunoblotted secara identik. Semua strip dicitrakan pada saat bersamaan. Strip tanpa ikatan representatif diperlihatkan untuk semua antibodi. * Pita yang dikuantifikasi.

SUPPLEMENTARY FIG. 6. Contoh immunoblot yang tidak dipangkas dari neutrofil yang diobati dengan inhibitor. Untuk menilai efek penghambatan LRRK2, semua sampel awal adalah imunoblot lagi bersama sampel yang terkait dengan inhibitor yang diobati. Semua sampel menjadi sasaran SDS-PAGE pada saat yang sama dan ditransfer dan immunoblotted secara identik. Semua strip dicitrakan pada saat bersamaan. Strip tanpa ikatan representatif diperlihatkan untuk semua antibodi. * Pita yang dikuantifikasi.

SUPPLEMENTARY FIG. 7. Kuantifikasi band LRRK2 yang terpisah dalam neutrofil. Gambar immunoblot LRRK2 S935 yang sama yang digunakan untuk Gambar 2 dianalisis ulang. Kali ini 280-kDa (A) dan 170-kDa (B) band dikuantifikasi secara terpisah. Total gambar imunoblot LRRK2 yang sama yang digunakan untuk Gambar 2 juga dianalisis kembali dengan pita 280-kDa (C) dan 170-kDa (D) lagi dikuantifikasi secara terpisah. Poin data individual dari kuantifikasi imunoblot ditampilkan pada grafik, serta rata-rata ± SEM. Analisis univariat dengan usia dan jenis kelamin sebagai kovariat digunakan untuk membandingkan 2 kelompok.

SUPPLEMENTARY Gambar 8. Fosforilasi LRRK2 dan Rab10 dalam PBMC. Sel mononuklear darah tepi diisolasi dari kontrol (n = 27) dan pasien penyakit Parkinson (n = 27). Sampel yang diberi noninhibitor diimunoblot untuk total kadar LRRK2 (A) dan S935 LRRK2 terfosforilasi, yang dinormalisasi menjadi β-aktin (B) dan total LRRK2 (C). Sampel yang diobati dengan noninhibitor diimunoblot untuk total kadar Rab10 (D) dan T73 yang difosforilasi, Rab10, yang dinormalisasi menjadi β-aktin (E) dan total Rab10 (F). Poin data individual dari kuantifikasi imunoblot ditampilkan pada grafik, serta rata-rata ± SEM. Analisis univariat dengan usia dan jenis kelamin sebagai kovariat digunakan untuk membandingkan 2 kelompok.

Download Jurnal Disini

Tags: