Jurnal Internasional Antibodi CiTE untuk AML | Jurnal Darah

Download Jurnal Disini

Dalam edisi ini Darah Herrmann dkk1 telah mengembangkan antibodi T-cell-engage (CiTE) penghambat pos pemeriksaan baru untuk myeloid leukemia akut (AML) dengan menggabungkan domain ekstraseluler protein kematian sel terprogram 1 (PD-1 ex) ke CD3 × CD33 bispecific T-cell engager (BiTE; lihat gambar panel AB). Penggabungan domain PD-1 ex meningkatkan aktivasi sel-T manusia dan menyebabkan sitotoksisitas efisien terhadap CD33 + / PD-L1 + sel in vitro dan dalam model xenograft murine. Yang penting, domain PD-1 ex tidak cukup untuk mengalihkan sel T ke PD-L1 + sel yang tidak memiliki target CD33. Ini penargetan preferensial CD33 + / PD-L1 + sel harus mengurangi efek samping terkait kekebalan terkait dengan efek on-target / off-tumor blokade pos pemeriksaan global dengan anti-PD1 / Antibodi monoklonal PD-L1 (mAbs).

“data-icon-position =” “data-hide-link-title =” 0 “>  Figure1 [19659006]

Desain dan sifat-sifat molekul BiTE dan CiTE. (A) Representasi skematik dari molekul mirip BiTE, domain scFv, terdiri dari 1 rantai variabel yang bervariasi (V H) bergabung dengan 1 variabel cahaya (V L) domain, terhubung ke dalam satu rantai polipeptida tunggal. Salah satu dari 2 domain scFv distal (putih) adalah spesifik untuk CD3ε, dan yang lainnya (abu-abu) adalah spesifik untuk CD33 Garis penghubung hitam mewakili penghubung Gly4Ser fleksibel antar domain. (B) Representasi skematik molekul CiTE. Molekul CiTE dibangun dengan menggabungkan PD-1 ex ke CD3 × CD33 BiTE. (C) Mekanisme aksi BiTE. Untuk menginduksi aktivasi dan aktivitas sitotoksik oleh sel T, protein BiTE harus melibatkan sel T dan sel tumor (AML blast) secara bersamaan. Satu sel yang mengikat ke sel T atau sel target tidak menyebabkan aktivasi. Pengikatan simultan dari beberapa molekul BiTE ke sel T dan sel tumor mempromosikan pembentukan sinaps imunologis yang mengarah ke aktivasi sel T, pelepasan sitokin (IFN-γ), dan sitotoksisitas sel tumor. Aktivasi sel-T ini mengarah ke peningkatan regulasi molekul pos pemeriksaan seperti PD-1 pada sel T dan PD-L1 pada ledakan AML. PD-L1 berinteraksi dengan PD-1 pada sel T untuk menekan sitotoksisitas tumor T-cell-mediated. (D) Mekanisme tindakan CiTE. Blokade interaksi antara PD-1 pada sel T dan PD-L1 tumor oleh domain PD-1 ex dari CiTE mencegah anergi dan kelelahan sel T, yang mengarah ke peningkatan proliferasi sel-T dan pembunuhan sel tumor.

Antena antibodi merekrut sel T seperti BiTE terdiri dari fragmen variabel rantai tunggal (scFvs) dari setidaknya 2 antibodi dengan spesifitas yang berbeda, satu untuk antigen permukaan yang terkait dengan tumor. , dan yang lainnya untuk antigen permukaan pada sel efektor, seperti CD3ε pada sel T (lihat gambar panel A). Melalui kekhususan ganda mereka, BiTE membawa sel-sel tumor ke dekat dengan efektor sel-T secara independen HLA untuk membentuk sinapsis buatan. Sinapsis ini menginduksi aktivasi sel T diikuti oleh respon sitotoksik yang dimediasi melalui pelepasan perforin, granzim, sitokin, dan ekspresi Fas ligan (lihat gambar panel C). Berbagai kombinasi seluruh antibodi dan fragmennya telah menghasilkan> 60 format antibodi bispecific yang berbeda yang menargetkan AML. 2 Saat ini, 7 sel T yang berbeda mengarahkan antibodi bispecific yang menargetkan CD33 ( NCT02520427 NCT03224819 NCT03144245dan NCT03516760), CD123 ( NCT02152956 dan NCT02730312), atau CLL1 (MCLA 117; NCT03038230) berada dalam uji klinis fase awal untuk AML.

Satu mekanisme yang membatasi aktivitas antibodi bispecific tampaknya merupakan anergi dan kelelahan T-cell yang didorong oleh, antara lain, PD-1 / PD-L1 axis (lihat gambar panel C). Pada tahun 2014, blinatumomab, sebuah BiTE yang menargetkan CD3 dan CD19, disetujui untuk pengobatan leukemia limfoblastik akut sel B (B-ALL). Studi korelatif menunjukkan bahwa ekspresi PD-L1 secara signifikan lebih tinggi pada sel B-ALL dari nonresponders ke blinatumomab dibandingkan dengan responden dan kontrol. 3 Penelitian in vitro berikutnya menunjukkan bahwa blokade PD1 / PD- Sumbu L1 dengan mAb mengembalikan aktivitas blinatumomab. Data serupa telah dijelaskan dengan molekul saudara dari blinatumomab, AMG330, sebuah molekul BiTE yang merekrut sel T yang menargetkan CD33 dalam AML. AMG330 meningkatkan regulasi PD1 pada sel T dan PD-L1 pada ledakan AML in vitro. 45 Potensi sitotoksik, aktivasi sel-T, dan proliferasi semua sangat ditingkatkan setelah blokade PD Sumbu -1 / PD-L1 dengan mAbs. 45 Secara klinis, seorang anak yang tidak menanggapi blinatumomab menunjukkan pengurangan luar biasa dalam ledakan sumsum tulang dari 45% sampai 1% setelah terapi kombinasi dengan blinatumomab dan pembrolizumab (anti-PD1 mAb). 3 Dalam AML, kami mengamati peningkatan regulasi PD-1 pada sel T dan PD-L1 pada ledakan pada pasien yang diobati dengan Flotetuzumab ( NCT02152956) 6

Molekul novel CiTE yang dilaporkan oleh Herrmann et al adalah unik karena penggabungannya dengan domain PD-1 ex (afinitas pengikatan mikromolar yang rendah untuk PD-L1) daripada anti -PD-L1 scFv (K D = 9 nM) ke dalam molekul seperti CD33 × CD3 BiTE (lihat gambar panel B). Ini CiTE baru direkayasa untuk mengikat dengan afinitas yang lebih besar terhadap CD33 (K D = 29 nM) dari CD3 (K D = 121 nM) atau PD-L1 (kisaran mikromolar rendah) di memesan untuk memberikan pengikatan preferensial ke CD33 + sel target. Penghambatan pospoint dimediasi oleh novel CiTE tergantung pada keterlibatan CD33 pada sel target. Selanjutnya, CiTE secara selektif menargetkan CD33 + / PD-L1 + sel positif ganda atas CD33 + / PD-L1 dan CD33 / PD-L1 + sel positif tunggal karena pengikatan tergantung aviditas dari CD33 scFv dan domain PD-1 ex. Ini meningkatkan spesifisitas untuk mengikat ligan PD-1 pada CD33 + sel target dalam molekul CiTE dapat memberikan manfaat klinis yang signifikan dibandingkan dengan pemberian antibodi pemblokiran PD-L1 nontargeted. Kurangnya selektivitas tumor yang terkait dengan antibodi pemblokiran PD-L1 saat ini dapat menginduksi reaktivasi sembarangan dari semua sel T yang berpengalaman-antigen, termasuk sel T autoreaktif yang terdiam secara fungsional dan berpotensi merusak, yang menyebabkan efek samping terkait kekebalan selama dan setelah pengobatan. [19659024] 7

Herrmann dkk membandingkan PD-1 ex domain-mengandung CiTE ke CD24 konvensional CD3 × CD3 serta satu rantai tunggal (CD33 × CD3 × PD-L1) di mana modul PD-1 ex digantikan oleh skrofit anti-PD-L1 yang memiliki afinitas tinggi. Semua 3 molekul menginduksi aktivasi sel-T dengan cara yang dibatasi CD33, memberikan pembunuhan in vitro yang efisien dari CD33 + sel AML pada konsentrasi yang sangat rendah (kisaran pikomolar), dan membersihkan CD33 manusia + garis sel dalam model xenograft murine. CiTE secara signifikan meningkatkan (1) sekresi T-sel interferon-γ (IFN-γ) dan granzim B, (2) pembunuhan CD33 + PD-L1 + target pengekspresian ganda , dan (3) proliferasi sel T in vitro dibandingkan dengan CD24 CD3 × CD3 tradisional (lihat gambar panel D). Yang penting, CiTE dipamerkan kurang mengikat ke target CD33 / PD-L1 + dibandingkan dengan triplebody satu rantai. Pengikatan yang menurun dari target CiTE ke CD33-negatif mungkin telah mengurangi kehilangan berat badan (kemungkinan efek samping terkait kekebalan) yang terkait dengan rantai tunggal triplebody dalam model xenograft murine.

Antigen target CD33 muncul selama komitmen sel induk hematopoietik ke garis keturunan myelomonocytic dan diekspresikan pada ∼ 90% dari myeloblas AML. Hal ini juga dinyatakan pada monosit, sel dendritik myeloid, dan kurang begitu, pada makrofag dan granulosit. 2 Ligan untuk PD-1 dan PD-1 ex domain termasuk dalam yang baru. CiTE adalah PD-L1 dan PD-L2. Kedua ligan secara konstitutif diekspresikan pada sel B, sel dendritik, dan makrofag, dan sinyal proinflamasi diketahui menginduksi tingkat yang lebih tinggi dari kedua PD-L1 dan PD-L2. 8 Secara bersama-sama, pola ekspresi ini menunjukkan bahwa CiTE baru dapat menargetkan populasi sel myeloid normal selain ledakan AML. Penargetan ini dapat memperburuk cytokine release syndrome, toksisitas pembatas dosis utama yang diamati sampai saat ini dengan terapi antibodi bispecific. Studi praklinis di masa depan yang meneliti molekul CiTE baru pada tikus NSG yang dimanifestasikan yang dibentuk kembali dengan sel T manusia dan membawa tumor AML manusia primer yang telah dibuktikan.

Uji klinis fase awal yang menggabungkan konstruk antibodi merek-sel T dengan antibodi PD-1 / PD-L1 sedang berlangsung. Peningkatan spesifisitas yang diberikan oleh PD-1 baru ex domain-mengandung CiTE dijelaskan oleh Herrmann dkk mungkin menjadi langkah maju yang penting jika efek samping terkait kekebalan membatasi dalam uji coba awal ini.

Catatan Kaki [19659033] Pengungkapan konflik kepentingan: JFD menerima pendanaan penelitian dari Amphivena Therapeutics, MacroGenics, dan Novimmune; berfungsi sebagai konsultan untuk Amphivena Therapeutics, Celgene, Incyte, Karyopharm Therapeutics, RiverVest Venture Partners, dan Tioma Therapeutics; adalah Anggota Dewan Penasehat untuk Kelompok Perusahaan Selaku dan Mitra Ventura RiverVest; dan memiliki kepemilikan saham di Magenta Therapeutics dan WUGEN. M.P.R. menerima pendanaan penelitian dari Amphivena Therapeutics dan berfungsi sebagai konsultan untuk Venture Partners RiverVest.

Tags: